
多用于接种植物病毒一般做法是先使介体昆虫在毒源植物上饲毒一定时间后,将规定数量的昆虫转移到待接种的植株上使之取食传毒,经一定时间后喷施杀虫剂杀死介体昆虫为防止其他毒源污染,接种和鉴定应在防虫温室内进行对于由土壤微生物,例如禾谷多黏菌传播的病毒,最简便的方法是直接用含有禾谷多黏菌的病土接种
玉米矮花叶病田间抗病性鉴定,有人采用人工接毒和自然感染相结合的方法鉴定材料播种两行,一行供苗期人工接毒,一行供自然感病玉米出苗后在鉴定圃四周间隔6m,移栽种植矮花叶病株,供迁入蚜虫传播毒源人工接毒在3~4叶期进行先把带有玉米蚜的玉米或高粱病叶采回,用毛笔将蚜虫扫下,在培养皿内饥饿2h采取典型病株上部嫩叶,切去中脉,剪成长1.5cm宽1cm的叶段,放入皿内,置于阴凉处饲毒4h,然后把带有蚜虫的叶段置于待鉴定的玉米幼苗上部叶腋间或心叶中,每株接虫5头左右为不影响自然感染行,接种后不再喷药杀虫20d以后调查发病情况,随后全部拔除只留自然感病行,在玉米喇叭口期调查发病株率,抽雄期调查发病级别
同一种病害往往有多种接种方法,需根据抗病性鉴定的具体要求选用例如,水稻白叶枯病就有喷雾法灌水接种法针刺接种法剪叶接种法等多种接种方法喷雾接种法接近自然侵染情况,能较全面地评价水稻抗病性,尤其适于鉴定水稻抗侵入特性,但接种后需保湿,发病也较慢灌水接种法是在秧田中施用病原细菌悬浮液灌水淹苗,此法亦接近自然侵染方式,但需要多量接种体,耗费的劳力较多,发病较慢针刺接种法和剪叶接种法适于鉴定单个植株抗扩展特性,所需接菌量较少,接种成功率高,对温度湿度条件要求不严格,发病快,但不能用于鉴定抗侵入特性和在群体水平表达的抗病性在鉴定小麦对赤霉病的抗病性时,用孢子悬浮液喷雾法,可了解品种的抗侵入性和抗扩展性,用带菌滤纸法或注射法只能鉴定抗扩展性
在接种时,必须采用有代表性的接种物,亦即首先要保证接种物种(或变种专化型)的真实性,不得混杂有其他类群,另外还要求接种物在致病性(或毒性)上的代表性病原物群体大,变异性强,往往包含有多个毒性不同的小种或株系在小种专化性抗病性鉴定中,需用单个小种分别接种鉴定,有时也采用多小种混合接种,但这不能代替分小种接种在小种非专化性抗病性鉴定中,接种物一般以多菌系混合菌种为宜,以避免接种单一菌系,因致病性过强或过弱造成的抗病性失常现象在精密的试验中,尚需采用单孢菌系,此时则选用毒性能代表该小种,且适合度较高的菌系使用外购或赠与的菌种,有时所属小种无代表性,或混杂严重常造成鉴定失败有的菌种长期保存,辗转使用,不提纯复壮,生活力低下,发病不良,达不到鉴定要求
接种时还必须掌握适宜的诱发强度诱发强度是由接种体数量(菌量)与环境条件共同决定的,它表现在感病对照品种的发病程度上除特定的要求外,一般情况下发病程度应近似于自然情况下大流行时的病情,发病过轻,会将感病材料误认为抗病;发病过重,可能淘汰有中度抗病程度的材料
调节诱发强度可从控制接种菌量和调节病圃的环境条件两个方面下手对于低速流行病害,应以调节接种菌量为主,来掌握诱发强度,对于流行速度高的病害,则应以调节环境条件为主例如,提高小麦锈病病圃的诱发强度,应灌水保湿,促进结露稻瘟病圃以增施氮肥为主,小麦白粉病圃以增加播种密度提高植被中的郁闭程度和加大氮肥用量为主当然对这些病害,接种菌量也应大体适中棉花黄萎病枯萎病,玉米黑粉病丝黑穗病等,则必须首先控制接种菌量细菌性叶斑病更需注意接种剂细菌浓度当用高浓度的细菌悬浮液接种时,抗病品种也可能表现感病应先作预备试验,确定适宜的接菌量浓度室内接种鉴定,多采用控制接菌量的方法来调节诱发强度定量接种可用特制的孢子沉降塔小型定量接种器或医用注射器进行
为保证接种成功,田间喷雾或喷粉接种应选择傍晚有结露条件时进行,或接种后用塑料布覆盖保湿室内接种后,将接种植株置于保湿箱内保湿24~48h,然后移至温度光照强度日照时间和湿度适宜的条件下进行培养若环境条件不适宜,不仅会造成发病不充分,而且还可能导致抗病反应失常
植物在进行组织培养时,先修剪植株上的茎尖和花药,然后再分剪成大小相同的小株,浸泡在浓度为70%的酒精溶液中10~30秒,再接种到初代培养基中进行培养。等到细胞开始分化,形成愈伤组织的时候,需要进行继代培养,提高生长素浓度,促进根系生长。
植物进行组织培养的过程
在植物进行组织培养时,首先需要将多余的部分去除,然后用刷子清洗干净植株表面,再将植株分解成大小相同的小株,伤口处可以涂抹上多菌灵溶液,加快愈合的速度,起到杀菌消毒的作用,用干净的纱布包裹储存。
进行组织培养的容器需要消毒,可以使用高压灭菌或者过滤除菌,去除容器中的病菌,然后对植株也需要进行消毒处理,需要在超净台或者接种箱中进行,避免空气中的细菌感染植株,浸泡在浓度为70%的酒精溶液中10~30秒。
当到植株表面完全浸润后捞出,接种到初代培养基中,再将放置在培养室或者光照培养箱中培养,促进植株细胞的分化,快速形成顶芽、叶芽,形成的愈伤组织需要及时移置到分化培养基中培养,保证不同器官的形成。
当植株分化形成芽和球茎时,需要进行切割,增加芽和球茎的数量,提高繁殖的速度,然后进行继代培养,同时还需要通过脱毒苗培养来检测病毒,然后添加生长素,提高细胞分裂素的浓度,促进幼苗的生根和发芽。